2014 08-08

细胞染色方法总结

Hoechst染色：hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合有hoechest33342和hoechst33258两种（主要为凋亡活细胞）在紫外光下将核染为蓝色。Hoechst染细胞核会影响共聚焦显...

2014 08-08

酶组织化学对组织处理的基本要求

在酶组织化学研究中，仍需遵循标本制作五大基本步骤，即固定或不固定的标本、切片(冷冻或不冷冻)、孵育、显色和显微镜下观察。根据组织化学酶检出的基本步骤。主要有以下5方面影响酶活性：1．选择zui适温度、...

2014 08-01

SDS-PAGE实验试剂配制和操作方法

试剂：1.5x样品缓冲液(10ml):0.6ml1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml50%甘油，2ml10%的SDS，0.5ml巯基乙醇，1ml1%溴酚蓝，0.9ml蒸馏水。可在4℃保...

2014 08-01

双向电泳操作步骤

(一)*向等电聚焦1.从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT，不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管)，置室温溶解。2.在小管中加入0.01gDTT，Bio-Lyte4-6、5...

2014 07-25

蛋白质盐析分离法

一、蛋白质盐析分离的原理：蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶)，当盐浓度增大到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致...

2014 07-25

分光光度计维护方法说明

分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度zui常用的工具之一。仪器使用频繁，但甚少见到有人维护。其实，保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。JessicaGeisler博士是eppendorf...

2014 07-18

十五种细胞染色技术

1.酸性品红：酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容於水，略溶於酒精（0.3%）。是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、医学教|育网搜集整理髓部等薄壁细胞和纤维素壁。它跟...

2014 07-18

动物染色体标本的制备

每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体，在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期，此时染色体形态zui典型，然后通过低渗、固定、染色等步骤，便可在显微镜下呈现出其形态。实验用品器具：显微...

2014 07-10

吖啶橙区分活细胞DNA和RNA的荧光组织化学染色法

吖啶橙《acridineoran。AO)属于三环杂芳香类异嗜性阳离子荧光染料，主要以两种方式与核酸结合，一是嵌入核酸双链的碱基对之间；二是与单链核酸的磷酸发生静电相互作用。当吖啶橙与DNA或RNA结合...

2014 07-10

Hoechst 33258染色

1．原理Hoechst33258和Hoechst33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中摄取该染料。从而使细胞核着...

2014 07-03

碘化丙啶染色

1．原理碘化丙啶(propidiumiodide，PI)不能穿人完整的活细胞膜中，即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染，而坏死细胞由于失去膜的完整性，PI可进入细胞内与DNA结合，根据此特点...

2014 07-03

DAPI染色

1．原理DAPI为4’，6二脒基-2-苯吲哚(4’，6―diamidino-2―phenylindole)能与双链DNA小槽，特别是AT碱基结合，也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双...

2014 06-27

聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE胶的制备过程

聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白和寡核苷酸的分离，zui常用于蛋白质的分离，这里总结了DNA电泳的各种浓度PAGE胶配制的配方及制备方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE（Polyacrylamidege...

2014 06-27

血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳的原理与操作步骤

血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳主要涉及两个过程：一、血清脂蛋白的预染;二、预染的血清脂蛋白电泳分离。本文总结了血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳、试剂与器材以及操作步骤。原理：将血清脂蛋白用脂类染料(如苏丹黑或油红O...

2014 06-21

液相色谱-质谱联用的原理及应用

简介：色谱质谱的在线联用将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析。而且也简化了样品的前处理过程，使样品分析更简便。色谱质谱联用包括气相色谱质谱联用（GC-MS）...

2014 06-21

气相色谱质谱联用仪的使用方法

仪器名称：气相色谱质谱联用仪仪器型号：AgilentGC6890-5975IMS生产厂家：美国Agilent公司使用方法：气相配有顶空进样器、FID检测器；质谱为四极杆质量分析器。具体使用方法：一、开...

2014 06-13

免疫组化

实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。实验材料石蜡切试剂、试剂盒PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶...

2014 06-13

细胞计数的多种方法

*（也被拼写*）是一种蚀刻玻璃室提出双方将举行石英盖玻片*室地板0.1毫米以上。为9毫米2的总表面积的计数室中进行蚀刻。图1、*的尺寸。浓度的计算是根据上下方的盖玻片的体积。一个大广场（参见图2中的W...

2014 06-05

pH计使用注意

1、一般情况下，仪器在连续使用时，每天要标定一次；一般在24小时内仪器不需再标定。2、使用前要拉下电极上端的橡皮套使其露出上端小孔。3、标定的缓冲溶液一般*次用pH=6.86的溶液，第二次用接近被测溶...

2014 06-05

PH计正确使用与维护

酸度计简称pH计，由电极和电计两部分组成。使用中若能够合理维护电极、按要求配制标准缓冲液和正确操作电计，可大大减小pH示值误差，从而提高化学实验、医学检验数据的可靠性。一、正确使用与保养电极目前实验室...